Bīdāmās instrukcijas
Pirms sākat priekšmetstikliņu sagatavošanas procesu, pārliecinieties, ka esat apkopojis visus nepieciešamos materiālus, ieskaitot priekšmetstikliņus, pārklājuma spraugas, pilinātājus vai pipetes, kā arī visas ķīmiskās vielas vai traipus, kurus plānojat izmantot.
Ir divi galvenie slaidu veidi, ar kuriem jūs strādājat:
1. Standarta plakanā stikla slidkalniņš.
2. Depresija vai akas slidkalniņš, kam ir neliela aka vai ievilkums tā centrā, kas paredzēts ūdens vai šķidras vielas pilienam. Parasti tie ir dārgāki un parasti tiek izmantoti bez pārsega slīdēšanas.
Standarta priekšmetstikliņus var izgatavot no plastmasas vai stikla, kura izmērs ir 1 x 3 collas (25 x 75 mm) un no 1 līdz 1,2 mm biezumā.
Mitriem priekšmetstikliņiem ir būtiska nozīme pārsega slīdēšanas vai pārseguma stikls. Tas ir īpaši plāns, kvadrātveida stikla (vai plastmasas) gabals, kas ir rūpīgi novietots virs parauga piliena. Bez pārsega virsmas spraigums izraisītu pilienu veidošanu kupola formu. Vāks atspoguļo šo spriedzi, nodrošinot, ka paraugs ir plakans precīzai pārbaudei ar minimālu fokusēšanu. Turklāt vāks darbojas kā aizsardzība, neļaujot objektīva objektīvam traucēt parauga kritumu.
Mikroskopa slaidu stiprinājumi
Mikroskopa stiprinājumi attiecas uz metodēm, ko izmanto, lai nodrošinātu novērošanai mikroskopa priekšmetstikliņus vai paraugus. Galvenokārt ir četri veidi:
1. Slaidus stiprinājumi:Šie ir visizplatītākais veids un ietver parauga novietošanu uz plakanā stikla priekšmetstikliņa, bieži izmantojot montāžas vidi (piemēram, šķidrumu vai želeju), lai to noturētu vietā. Pēc tam tiek pievienota pārsega slīdēšana, lai aizsargātu paraugu un nodrošinātu plakanu virsmu skatīšanai.
2. dobums vai labi stiprinājumi:Šiem priekšmetstikliņiem ir neliela aka vai depresija centrā, kas paredzēta šķidruma pilienam, piemēram, ūdens vai specializēts montāžas šķidrums. Viņi tiek izmantoti, strādājot ar paraugiem, kuriem nepieciešama iegremdēšana šķidrumā.
3. Pagaidu stiprinājumi:Šie stiprinājumi nav domāti ilgstošai uzglabāšanai vai novērošanai. Tās ir saistītas ar vienkāršām un ātrām metodēm, piemēram, parauga novietošanu uz slaida ar pilienu ūdens. Tos bieži izmanto dzīvu organismu vai laika jutīgu paraugu novērošanai.
4. Pastāvīgie stiprinājumi:Tie ir paredzēti ilgstošai uzglabāšanai un novērošanai. Tās ietver sarežģītākas procedūras, ieskaitot specializētu montāžas datu nesēju izmantošanu, kas laika gaitā sacietē, iekapsulējot paraugu caurspīdīgā vidē. Šāda veida stiprinājumu bieži izmanto izglītības slaidiem un zinātniskiem pētījumiem.
Katram stiprinājuma veidam ir savi specifiski pielietojumi, un tas tiek izvēlēts, pamatojoties uz parauga raksturu un novērojuma mērķi.
Četri izplatīti veidi, kā uzstādīt mikroskopa slaidu
Mikroskopa priekšmetstikliņa uzstādīšanai ir vairākas izplatītas metodes atkarībā no parauga veida un novērošanas mērķa. Šeit ir četri izplatīti veidi, kā uzstādīt mikroskopa slaidu:
Sausa montāža:
Procedūra: Šajā metodē paraugu novieto tieši uz tīra, sausa mikroskopa priekšmetstikliņa. To bieži izmanto paraugiem, kuriem nav nepieciešams papildu mitrums vai iegremdēšana šķidrumā.
Pielietojums: Sausa montāža ir piemērota, lai novērotu cietus paraugus, piemēram, augu daļas, matus vai minerālus.
Mitra montāža:
Procedūra: uz priekšmetstikliņa tiek novietots neliels šķidruma piliens (parasti ūdens vai specializēts montāžas šķidrums), un pēc tam paraugu pievieno šim pilienam. Pār paraugu maigi novieto pārsega slīdēšanu, lai novērstu izžūšanu un kropļojumu.
Pielietojums: Mitros stiprinājumus izmanto dzīvu organismu, šūnu vai paraugu novērošanai, kuriem nepieciešama iegremdēšana šķidrumā.
Skvoša stiprināšana:
Procedūra: Šī paņēmiens ietver parauga novietošanu uz priekšmetstikliņa un pēc tam maigi nospiežot to ar pārsega slīdni vai citu slaidu, lai to saplacinātu. To parasti izmanto mīkstajiem audiem vai smalkām augu daļām, lai novērošanai izveidotu plānu, caurspīdīgu slāni.
Pieteikumi: Skvoša stiprinājumi tiek izmantoti audu pārbaudei, īpaši augu bioloģijā.
Uztriepes montāža:
Procedūra: neliels daudzums parauga (parasti šķidruma vai daļēji šķidruma viela) tiek sadalīts plānā un vienmērīgi pa priekšmetstikliņu, bieži izmantojot cita slaida malu. Pēc tam to atļauts sauss vai to var fiksēt ar ķīmisku vielu.
Pieteikumi: uztriepes stiprinājumus parasti izmanto, lai novērotu mikroorganismus, piemēram, baktērijas, vai asins uztriepes sagatavošanai mikroskopijai.
Šīs metodes atbilst dažāda veida paraugiem un to īpašajām novērošanas prasībām. Montāžas tehnikas izvēle ir atkarīga no tādiem faktoriem kā parauga rakstura, novērošanas mērķa un vēlamā detalizācijas un skaidrības līmeņa.
Mikroskopa traipi
Mikroskopa traipi, kas pazīstami arī kā bioloģiskie traipi vai krāsvielas, ir vielas, ko izmanto mikroskopijā, lai uzlabotu bioloģisko paraugu kontrastu un redzamību. Tie darbojas, selektīvi saistoties ar specifiskiem šūnu komponentiem, piemēram, olbaltumvielām, nukleīnskābēm vai lipīdiem, kas ļauj vieglāk vizualizēt un diferencēt šūnu struktūras. Šeit ir daži izplatīti mikroskopa traipu veidi:
1. Hematoksilīns un eozīns (H&E):
Tips: kombinācijas traips.
Lietojums: Viens no visplašāk izmantotajiem histoloģijas traipiem, hematoksilīna traipu šūnu kodolu zili purpursarkanā krāsā, savukārt eozīna krāso citoplazmu un dažas ārpusšūnu struktūras rozā.
2. metilēnzilā:
Tips: pamata krāsviela.
Lietojums: Staciņ šūnu kodolu zilā krāsā. To parasti izmanto vispārējam citoloģijas un mikrobioloģijas pētījumos.
3. Giemsa:
Tips: kombinācijas traips.
Lietojums: Izmanto asins šūnu krāsošanai, tas atšķir kodola un citoplazmatiskos komponentus dažādās krāsās, ļaujot identificēt dažādus šūnu veidus.
4. Gram traips:
Tips: kombinācijas traips.
Lietojums: atšķir divas galvenās baktēriju kategorijas: grampozitīvas (kas saglabā kristāla violeto traipu) un gramnegatīvi (kas aizņem Safranin pretstatu).
5. Wright traips:
Tips: kombinācijas traips.
Lietošana: Galvenokārt tiek izmantots asins uztriepes, šis traips ļauj diferencēt asins šūnu tipus un identificēt patoloģijas.
6. Lugola jods:
Tips: joda bāzes traips.
Lietojums: Izmanto kopā ar Gram jodu, to var izmantot, lai uzlabotu noteiktu šūnu struktūru kontrastu.
7. Eļļas sarkanais o:
Tips: lipofīlā krāsa.
Lietojums: īpaši saistās ar lipīdiem, padarot to noderīgu struktūru krāsošanai, piemēram, tauku pilieniem šūnās.
8. Periodiskā skābe-Šifs (PAS):
Tips: uz ķīmiskas reakcijas bāzes traipu.
Lietojums: reaģē ar ogļhidrātiem, izceļot tādas struktūras kā glikogēns, mucīni un citi glikoproteīni.
9. Toluidine Blue:
Tips: pamata krāsviela.
Lietojums: Stacināt skābus komponentus šūnās un audos, ieskaitot tuklo šūnu granulas un nukleīnskābes.
10. Safranīns:
Tips: pamata krāsviela.
Lietojums: Izmanto kā pretstatu gramu krāsošanā ar krāsu gramnegatīvām baktērijām.
Šie ir tikai daži piemēri, un mikroskopijā ir daudz citu specializētu traipu, piemēram, speciāli traipi saistaudiem, nervu šķiedrām vai īpašām šūnu struktūrām. Traipu izvēle ir atkarīga no parauga veida un informācijas, kas nepieciešama no mikroskopiskās pārbaudes.
Mikroskopa krāsošanas pakāpieni
1. Sāciet, sagatavojot slapja stiprinājuma priekšmetstikliņu, novietojot paraugu uz tīra mikroskopa priekšmetstikliņa.
2. Izmantojot acu pilinātāju vai pipeti, uzmanīgi savāciet izvēlētā traipa pilienu.
3. Novietojiet šo traipu pilienu uz vāka slīdēšanas ārējās malas, nodrošinot, ka tas saskaras ar slaida malu.
4. Lai atvieglotu traipu vienmērīgu sadalījumu, novietojiet salvetes gabalu vai papīra dvieli gar vāka slīdēšanas pretējo pusi, stingri piespiežot to pret malu.
5. Ja nepieciešams, izmantojiet papildu traipu kritumu, lai garantētu pilnīgu parauga pārklājumu.
6. Jūsu slaids tagad ir pilnībā sagatavots novērošanai mikroskopā.
